TargeteddeletionofDicerintheheartleadstodilatedcardiomyopathyandheartfailure
关键词：Dicer；miRNAs；DCM
背景：心血管疾病是人类发病和死亡的主要原因死亡率。扩张型心肌病（DCM）是一种心肌疾病，终末期患者主要表现为心力衰竭。Dicer，是一种核糖核酸内切酶，属于RNaseIII家族中特异识别双链RNA的一员，由DCR基因编码，在siRNA和miRNA的产生过程中起着重要的作用，Dicer在胞质内负责加工剪接pre-miRNA变为成熟的双链miRNA。
为了探究miRNA与心脏疾病的相关性，作者从调控miRNA成熟的Dicer出发，构建Dcier-cKO小鼠，发现cko小鼠可快速死亡并表现为进行性扩张型心肌病、心力衰竭表型。并且证实了Dicer在心脏收缩中的重要作用，表明miRNAs在正常心脏功能和心血管疾病的病理状态中起着关键作用。
1，构建Dicer-cKO小鼠：作者选择22，23号外显子进行敲除，22，23号外显子是编码RNaseIII功能的区域，同时进行了DNA和蛋白水平验证Dicer-cKO小鼠构建成功
2，Dcier-cKO小鼠，成熟的miR减少：对胚胎期E14.5到P0小鼠的miR以及心脏特异性的miR-表达量进行分析，结果显示miR前提物质增多，成熟的miR减少。Dicer-cKO小鼠出现miR成熟障碍。
3，Dcier-cKO小鼠心脏结构发生改变：出现生存期缩短，心脏大体结构、心肌超微结构的改变。主要表现为心腔变大，心室壁变薄，左心室、心房内可见血栓形成，肌原纤维排列紊乱
4，Dcier-cKO小鼠表现为扩张性心肌病表型：超声心动图结果显示cko小鼠FS%较ctrl下降50%以上，左室收缩末径明显增加。结合心脏病理图示结果左侧心室扩张为主，室壁变薄，符合扩张性心肌病的诊断结果。
5，Dcier-cKO小鼠心肌细胞凋亡增加：应用TUNNEL对左心室、左心房进行凋亡相关染色，发现Dicer-cko小鼠心房肌、心室肌细胞凋亡明显增加
6，Dcier-cKO小鼠，传导相关蛋白发生改变：心脏超声结果显示，Dcier-cKO小鼠较对照组相比，出现了心率明显的下降，猜测cko小鼠可能出现传导功能异常，作者检测传导相关的cx40，cx43，cx45蛋白表达情况，发现Dcier-cKO的小鼠较对照组相比cx40表达下降，cx45表达升高。
同时作者选取了E16.5，E18.5，P0三个时期心肌组织，进行增殖相关的PH3，Brdu，ki-67染色结果显示，Dicer-cko小鼠和ctrl未见明显差异
7，Dicer-cKO小鼠表现出收缩功能障碍：作者进行了心肌收缩相关蛋白检测cTNT，α-TM的检测，发现Dicer-cKO小鼠较对照组相比，心肌相关的收缩蛋白明显下降，表现出收缩功能障碍
8，人心衰样本检测Dicer改变：为了进一步验证Dicer在临床样本中是否存在改变，作者选取了临床终末期心衰患者的心肌组织在蛋白水平进行Dicer检测，发现终末期心衰患者心肌组织Dicer表达量下降，经过左心室辅助装置（LVAD）治疗后，Dicer表达量会上升
总结
?1，心脏特异性的敲除Dicer，小鼠可以存活，但是生存期明显缩短，不超过4天，且心脏成熟的miRNA表达量下降。
?2，Dicer-cKO小鼠，心脏收缩功能下降，左心室扩大，呈现扩张性心肌病的病理表现
?3，Dicer-cKO小鼠，收缩相关蛋白下降（cTnT，MHC），传导相关的蛋白表达发生改变（cx40,cx45）
?4，Dicer在心衰患者中表达下降，经LVAD治疗的患者Dicer表达增加，预测Dicer可以成为LVAD临床治疗的评价指标
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